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酶標(biāo)儀實(shí)際上就是一臺變相光電比色計(jì)或分光光度計(jì)，其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計(jì)基本相同. 圖示是一種單通道自動進(jìn)樣的酶標(biāo)儀工作原理圖.光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光，進(jìn)入塑料微孔極中的待測標(biāo)本.該單色光一部分被標(biāo)本吸收，另一部分則透過標(biāo)本照射到光電檢測器上，光電檢測器將這一待測標(biāo)本不同而強(qiáng)弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號.電信號經(jīng)前置放大，對數(shù)放大，模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計(jì)算，最后由顯示器和打印機(jī)顯示結(jié)果. 微處理機(jī)還通過控制電路控制機(jī)械驅(qū)動機(jī)構(gòu)X方向和Y方向的運(yùn)動來移動微孔板，從而實(shí)現(xiàn)自動進(jìn)樣檢測過程.而另一些酶標(biāo)儀則是采用手工移動微孔板進(jìn)行檢測，因此省去了X,Y方向的機(jī)械驅(qū)動機(jī)構(gòu)和控制電路，從而使儀器更小巧，結(jié)構(gòu)也更簡單.

微孔板是一種經(jīng)事先包理專用于放置待測樣本的透明塑料板，板上有多排大小均勻一致的小孔，孔內(nèi)都包埋著相應(yīng)的抗原或抗體，微孔板上每個(gè)小孔可盛放零點(diǎn)幾毫升的溶液.

光是電磁波，波長100nm～400nm稱為紫外光，400nm～780nm之間的光可被人眼觀察到，大于780nm稱為紅外光。人們之所以能夠看到色彩，是因?yàn)楣庹丈涞轿矬w上被物體反射回來。綠色植物之所以是綠色，是因?yàn)橹参镂盏拇蟛糠譃榧t橙光和藍(lán)紫光，但對綠色不吸收，反射出來，所以植物呈現(xiàn)為綠色。酶標(biāo)儀測定的原理是在特定波長下，檢測被測物的吸光值。

檢測單位

光通過被檢測物，前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量，特定波長下，同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。

檢測單位用OD值表示， OD是optical density（光密度）的縮寫，表示被檢測物吸收掉的光密度， OD=log（1/trans），其中trans為檢測物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則，OD值與光強(qiáng)度成下述關(guān)系：

E=OD=log(lo/Ι) 其中E表示被吸收的光密度， Ιo 為在檢測物之前的光強(qiáng)度，Ι為從被檢測物出來的光強(qiáng)度。

OD值由下述公式計(jì)算：

c為檢測物的濃度 b為檢測物的厚度 a為摩爾因子

在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長，在此波長下，此物質(zhì)能夠吸收最多的光能量。如果選擇其它的波長段，就會造成檢測結(jié)果的不準(zhǔn)確。因此，在測定檢測物時(shí)，我們選擇特定的波長進(jìn)行檢測，稱為測量波長。

但是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收，為了消除這種非特異性吸收，我們再選取一個(gè)參照波長，以消除這個(gè)不準(zhǔn)確性。在參照波長下，檢測物光的吸收最小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。

檢測值計(jì)算

儀器中的檢測器接收透過被檢測物的光能量，轉(zhuǎn)換成二進(jìn)位數(shù)字信號，最大為4095。儀器定義沒有光源下的透光值為 0%，沒有檢測物的透光值為100%。則實(shí)際檢測中，檢測物的透光值均在 0%一100%之間。透光值

的計(jì)算如下：

T=（Meas—Min）/（Max—Min）

其中T為透光值， Meas為檢測的二進(jìn)位數(shù)值， Min為在 0%的情況下檢測的二進(jìn)位數(shù)值， Max為在100%的情況下檢測的二進(jìn)位數(shù)值，舉例如下：

MaX=3600

Min=20

Meas=30

T=（30-20）/3600-20)=0．0028

OD=log（1/T）=log（1/0.0028）=2.552

中心定位

儀器會自動對酶標(biāo)孔進(jìn)行中心定位，中心定位是要消除酶標(biāo)孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來檢測的不準(zhǔn)確。在對每一個(gè)酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測時(shí)，儀器其實(shí)要進(jìn)行35個(gè)點(diǎn)的測量，選取最中間的5個(gè)點(diǎn)的均值為本孔的OD值。

光源的參照通道

參照通道是用來校準(zhǔn)由于電壓不穩(wěn)或燈泡磨損帶來的影響。

用途和其它提示

用于ELISA試劑的測定，廣泛用于各種實(shí)驗(yàn)室，包括臨床實(shí)驗(yàn)室。

質(zhì)量控制

質(zhì)量控制是試劑檢測的重要因素。請按照試劑說明書的要求進(jìn)行質(zhì)量控制。

空白校正

有一些試劑盒的說明書將空白孔設(shè)置為空氣，其它大多數(shù)空白孔的設(shè)置是用試劑來設(shè)置的，請按照試劑盒的說明書要求進(jìn)行。

檢測結(jié)果的解釋

由于有相當(dāng)多的因素會影響檢測的結(jié)果，如不同的酶標(biāo)板，檢測試劑的體積，都會造成OD值的不同，因此，只有使用同一酶標(biāo)板反應(yīng)的試劑檢測結(jié)果才能比較和分析。對結(jié)果的臨床解釋請依照試劑盒的說明書進(jìn)行.

結(jié)構(gòu)

規(guī)格有40孔板，55孔板，96孔板等多種，不同的儀器選用不同規(guī)格的孔板，對其可進(jìn)行一孔一孔地檢測或一排一排地檢測.

酶標(biāo)儀所用的單色光既可通過相干濾光片來獲得，也可用分光光度計(jì)相同的單色器來得到.在使用濾光片作濾波裝置時(shí)與普通比色計(jì)一樣，濾光片即可放在微孔板的前面，也可放在微孔板的后面，聚光鏡，光欄后到達(dá)反射鏡，經(jīng)反射鏡作90°反射后垂直通過比色溶液,然后再經(jīng)濾光片送到光電管.

從酶標(biāo)儀工作框圖和光路圖上可看出，它和普通的光電比色計(jì)有以下幾點(diǎn)差異：

（l）盛裝待測比色液的容器不再使用比色皿，而是使用塑料微孔板.微孔板常用透明的聚乙烯材料制成，對抗原抗體有較強(qiáng)的吸附作用，故用它作為固相載體.

⑵由于盛樣本的塑料微孔板是多排多孔的，光線只能垂直穿過，因此酶標(biāo)儀的光束都是垂直通過待測溶液和微孔板的，光束既可是從上到下，也可以是從下到上穿過比色液.

⑶酶標(biāo)儀通常不僅用A，有時(shí)也使用光密度OD來表示吸光度.酶標(biāo)儀可分為單通道和多通道2種類型，單通道又有自動和手動2種之分.自動型的儀器有X,Y方向的機(jī)械驅(qū)動機(jī)構(gòu)，可將微孔板L的小孔一個(gè)個(gè)依次送入光束下面測試，手動型則靠手工移動微孔板來進(jìn)行測量.

在單通道酶標(biāo)儀的基礎(chǔ)上又發(fā)展了多通道酶標(biāo)儀，此類酶標(biāo)儀一般都是自動化型的.它沒有多個(gè)光束和多個(gè)光電檢測器，如 12個(gè)通道的儀器設(shè)有 12條光束或 12個(gè)光源，12個(gè)檢測器和12個(gè)放大器，在X方向的機(jī)械驅(qū)動裝置的作用下，樣品12個(gè)為一排被檢測.多通道酶標(biāo)儀的檢測速度快，但其結(jié)構(gòu)較復(fù)雜價(jià)格也較高.

摘自《陜西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)》1998.13⑷12

摘要 為提高酶標(biāo)儀檢測結(jié)果的室內(nèi)重復(fù)性和增強(qiáng)室間可比性，對已建立的酶標(biāo)儀性能評價(jià)與鑒定的基該方法進(jìn)行了詳細(xì)解釋和補(bǔ)充，以供同行在評價(jià)、鑒定儀器時(shí)參考與應(yīng)用。

可廣泛應(yīng)用于低紫外區(qū)的DNA、RNA定量及純度分析（A260/A280）和蛋白定量（A280/BCA/Braflod/Lowery），酶活、酶動力學(xué)檢測，酶聯(lián)免疫測定（ELISAs），細(xì)胞增殖與毒性分析，細(xì)胞凋亡檢測（MTT），報(bào)告基因檢測及G蛋白偶聯(lián)受體分析（GPCR）等

分類 項(xiàng)目名稱 簡　稱

血液學(xué)檢驗(yàn) 血小板相關(guān)抗體的檢驗(yàn) PAIgA、PAIgG、PAIgM

D-二聚體的測定 D-Dimer

血清纖維蛋白降解產(chǎn)物的測定 FDP

三碘甲腺原氨酸、四碘甲腺原氨酸測定 T3、T4

免疫學(xué)檢驗(yàn) C反應(yīng)蛋白的測定 CRP

免疫球蛋白的測定 IgD、IgE

循環(huán)免疫復(fù)合物的測定 CIC

類風(fēng)濕因子的測定 IgG、IgA、IgM類RF

抗甲狀腺球蛋白抗體、微粒體抗體的測定 TG、TM

腫癌免疫學(xué)檢測 甲胎蛋白的測定 AFP

癌胚抗原的測定 CEA

前列腺特異抗原的測定 PSA

胰癌、膽道癌、胃癌的測定CA19-9

卵巢癌的測定 CA125

乳腺癌的測定 CA15-3

宮頸鱗癌的測定 SCC

多發(fā)性骨髓癌的測定

甲狀腺癌的測定 hTG

傳染病免疫學(xué)檢驗(yàn) 甲肝血清學(xué)的檢測 抗HAV-IgM乙肝血清學(xué)的檢測 兩對半

丙肝血清學(xué)的檢測 抗HAV-IgG、抗HCV-IgM

丁肝血清學(xué)的檢測 抗HDV-IgG、抗HDV-IgM

戊肝血清學(xué)的檢測 抗HEV-IgG

腎綜合征出血熱類抗體的檢測 HFRS-IgG

乙型腦炎病毒抗體的檢測 IgM

人類免疫缺陷病毒抗體（即艾滋?。┑臋z測 HⅣ　β 2 M

優(yōu)生優(yōu)育功能檢測 弓形蟲（體）病毒的檢測 TOXO

風(fēng)疹病毒的檢測 RV

巨細(xì)胞病毒的檢測 CMV

單純皰病毒的檢測 抗HSV（Ⅰ、Ⅱ）

其它本儀器還可做基因檢驗(yàn)及獸殘、農(nóng)殘檢驗(yàn)項(xiàng)目等

酶標(biāo)儀（MicroplateReader）是對酶聯(lián)免疫檢測（EIA）實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行讀取和分析的專業(yè)儀器。酶聯(lián)免疫反應(yīng)通過偶聯(lián)在抗原或抗體上的酶催化顯色底物進(jìn)行的，反應(yīng)結(jié)果以顏色顯示，通過顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標(biāo)本中待測抗體或抗原的濃度。

酶標(biāo)儀廣泛地應(yīng)用在臨床檢驗(yàn)、生物學(xué)研究、農(nóng)業(yè)科學(xué)、食品和環(huán)境科學(xué)中，特別在近幾年中，由于大量的酶聯(lián)免疫檢測試劑盒的應(yīng)用，使得酶標(biāo)儀在生殖保健領(lǐng)域中應(yīng)用越來越廣泛，同時(shí)促進(jìn)了生殖健康技術(shù)水平提高。

目前國內(nèi)許多計(jì)生站系統(tǒng)開展了酶免檢測項(xiàng)目，如：乙肝五項(xiàng)、艾滋病檢測、優(yōu)生優(yōu)育系列檢測、激素檢測等。過去多數(shù)采用目測方法，報(bào)出的結(jié)果缺乏科學(xué)的依據(jù)。例如：某弓形蟲檢測試劑盒中，臨界值規(guī)定為：陰性對照品的OD值×2.5，通過目測無法判斷標(biāo)本孔的反應(yīng)顏色是否超過臨界值。肉眼進(jìn)行兩孔之間的顏色比較可能還行，但比較一孔的顏色是否超過另一孔顏色的2.5倍就不可能。

國內(nèi)多家權(quán)威機(jī)構(gòu)，如衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心和計(jì)劃生育系統(tǒng)等多次強(qiáng)調(diào)酶標(biāo)儀的重要性，并要求酶聯(lián)免疫檢測試劑應(yīng)使用酶標(biāo)儀判讀，酶免試劑的質(zhì)控也應(yīng)使用酶標(biāo)儀，并提供酶標(biāo)儀測定的原始數(shù)據(jù)，而各廠家的試劑盒說明書沒有是讓用目測的。同時(shí)酶免檢測的項(xiàng)目往往是一些實(shí)質(zhì)性的感染和病變（如：肝炎、艾滋病、優(yōu)生優(yōu)育等），判讀更要求嚴(yán)謹(jǐn)，由誤診引起的糾紛很難處理。另外，住院手術(shù)病人術(shù)前的丙肝、艾滋等EIA試劑檢測是避免因輸血引起感染引發(fā)的醫(yī)療事故糾紛的必要手段，正逐漸被許多單位所采用。

中國免疫診斷方法主要有如下三種：酶免（EIA）、放免（RIA）和發(fā)光，在市場上的情況如下：

方法所處市場周期

放免衰退期

酶免成長期

發(fā)光進(jìn)入期

放免技術(shù)由于試劑的污染和有效期等問題在國際和國內(nèi)市場逐漸被淘汰，而化學(xué)發(fā)光試劑和設(shè)備比較昂貴，使得其在國內(nèi)的普及特別在計(jì)生系統(tǒng)普及需要較長時(shí)間，EIA技術(shù)穩(wěn)定，試劑價(jià)格合理，供應(yīng)充，酶免技術(shù)在中國市場處于成長期，因此購買酶標(biāo)儀正合適宜。

尤其要提到的是，在中國的計(jì)劃生育和婦幼保健系統(tǒng)配備酶標(biāo)儀已經(jīng)迫在眉睫。早在幾年以前，世界衛(wèi)生組織已建議對孕婦進(jìn)行TORCH 五項(xiàng)常規(guī)篩查，但是遺憾的是由于缺乏酶標(biāo)儀和洗板機(jī)等設(shè)備，RCH的檢測在中國還未能普遍開展。TORCH感染在圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)中稱為TORCH綜合癥，由于孕婦，胎兒和新生兒都易被感染，它已受到全世界婦產(chǎn)科和兒科的極大重視。

妊娠期感染不僅危害母體，往往還可對胎兒和新生兒產(chǎn)生嚴(yán)重影響。通過胎盤可引起子宮內(nèi)感染而導(dǎo)致流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎或胎兒生長遲緩和畸形，通過產(chǎn)道和母乳可引起新生兒感染。如累及神經(jīng)系統(tǒng)可造成不同程度的智力障礙以及各種癱瘓、失聰ORCH感染與優(yōu)生優(yōu)育有極為重要的關(guān)系。因此，RCH（IgG和IgM）檢查通常也稱為優(yōu)生優(yōu)育十項(xiàng)檢查。目前，TORCH的檢測方法主要有放免（RIA）和酶免（EIA）。由于放免方法需要特殊儀器，且有放射危害，目前正被酶免（EIA）方法取代。EIA方法具有特異性強(qiáng)，靈敏度高，簡單快速，成本低等優(yōu)點(diǎn)，只要配備有酶標(biāo)儀和其他相應(yīng)的設(shè)備，多數(shù)普通實(shí)驗(yàn)室均可方便地開展。很顯然，盡快在計(jì)生系統(tǒng)普及酶標(biāo)儀等設(shè)備是一個(gè)迫切的需求。

這項(xiàng)工作的落實(shí)將有助于提高診治水平，降低母嬰發(fā)病率，從而提高整個(gè)國民的健康素質(zhì)。目前市場上提供的EIA試劑越來越多，如：T3、 T4、TSH、TORCH系列、不孕系列、各種癌癥標(biāo)志物、傷寒、副傷寒等，另外通過母嬰傳播的性傳播疾?。ㄈ缌懿　⒚范?、HⅣ）和肝炎（如HBV、 HCV），以及胎兒的抗體，新生兒TSH的測定，疫苗反應(yīng)等，市場上也都有成套EIA試劑盒供應(yīng)。使用酶標(biāo)儀有利于拓展檢測項(xiàng)目，提高檢測水平，其社會效益和經(jīng)濟(jì)效益并舉。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)方法簡稱酶標(biāo)法，是標(biāo)記技術(shù)中的一種，是從熒光抗體技術(shù)、同位素免疫技術(shù)發(fā)展而來的一種敏感，特異，快速并且能自動化的現(xiàn)代技術(shù).

Eon 全波長酶標(biāo)儀

BioTek Eon 全波長讀數(shù)儀具備微孔板和比色杯測量的雙重功能，既可作為全波長酶標(biāo)儀，也可作為全波長分光光度計(jì)使用。比色杯類型包括標(biāo)準(zhǔn)比色杯，以及Biocell微量比色杯。波長范圍從200nm到1000nm，包括紫外和近紅外，可以自由選擇任何波長。

220V/50HZ

4--45℃

10%-90%。

酶標(biāo)儀是一種精密的光學(xué)儀器，因此良好的工作環(huán)境不僅能確保其準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性，還能夠延長其使用壽命。根據(jù)DINVDE0871條例，儀器應(yīng)放置在無磁場和干擾電壓的位置。依據(jù)DIN45635－19條例：

儀器應(yīng)放置在低于40分貝的環(huán)境下。

為延緩光學(xué)部件的老化，應(yīng)避免陽光直射。

操作時(shí)環(huán)境溫度應(yīng)在15℃－40℃之間，環(huán)境濕度在15%－85%之間。

操作電壓應(yīng)保持穩(wěn)定。

操作環(huán)境空氣清潔，避免水汽，煙塵。

保持干燥、干凈、水平的工作臺面，以及足夠的操作空間。

光柵光路系統(tǒng)，包括內(nèi)建的參比檢測通道，確保任何測量情況下獲得一致的結(jié)果。

長壽命閃爍氙燈光源，光柵單色光發(fā)生器，200 ~1000 nm波長范圍內(nèi)全波長掃描，1nm步進(jìn)

在微孔板檢測模式和比色杯檢測模式下均可進(jìn)行全波長范圍光譜掃描，對樣品和空白同時(shí)掃描。

10s，200~1000nm，1nm步進(jìn)

無需衍生處理，即可直接測定DNA、RNA和蛋白的吸光值。

使用微孔板檢測時(shí)可直接讀出OD值和濃度，對于水相溶液可使用光程校正

可使用96&384孔板，或標(biāo)準(zhǔn)杯/微量杯

帶寬2.4nm

0 ~ 4 OD

@450nm：0 ~ 2.5 Abs，±2%

@450nm：1%+0.003 Abs（0~2.0Abs），2%(2.0~2.5Abs）

@450nm <1.0% CV

8s/96孔；13s/384孔

微孔板和比色杯模式均具溫控功能，溫控范圍（室溫+4)~ 65℃

軌道，雙軌道和線性三種調(diào)速振蕩模式，動力學(xué)過程中可執(zhí)行背景振蕩模式

通過PC端數(shù)據(jù)分析軟件Gen5進(jìn)行操作和設(shè)置

曲線擬合、定量分析、定性分析、動力學(xué)計(jì)算、自定義方程以、平行線分析（PLA，符合歐盟法規(guī)要求）及效價(jià)分析等。數(shù)據(jù)可一鍵導(dǎo)出到Excel，也可生成詳盡的結(jié)果報(bào)告。

電源輸入 100 - 240 V (50/60 Hz），最大功率消耗 90W

外部尺寸（H x W x D) 216 x 216 x 406mm

11kg

全波長讀數(shù)儀一套（含比色杯基座）（比色皿必須為立式），標(biāo)準(zhǔn)96孔酶標(biāo)板一包，電源線壹根，說明書一份，軟件光盤一張。

⒋1.1將酶標(biāo)儀后部的電源開關(guān)燈打開，儀器將顯示自檢、基礎(chǔ)酶聯(lián)、軟件版本號，隨后顯示基礎(chǔ)酶聯(lián)、準(zhǔn)備和時(shí)間。在自檢過程中，儀器對每一個(gè)已裝的濾光片選擇合適的光強(qiáng)度，開機(jī)后，等候1分鐘預(yù)熱。

⒋1.2開機(jī)后，測量模式1及其某些參數(shù)（如：單波長檢測、1號濾光片、不作數(shù)據(jù)計(jì)算，進(jìn)板方式、無板統(tǒng)計(jì)分析和打印機(jī)方式）都已默認(rèn)。

⒋2.1按下paper feed健，取下運(yùn)輸中裝入打印機(jī)系統(tǒng)的紙張，將卷紙游離端插入儀器后部的插口，直至有輕微阻力感。注意卷紙轉(zhuǎn)動的正確方向。

⒋2.2按下paper feed健，直至將紙送入打印機(jī)。將卷軸插入卷紙，將卷軸及卷紙放入儀器后部的凹槽。

選擇程序模式時(shí)，先按shirt鍵，再按enter鍵。程序模式有：基礎(chǔ)酶聯(lián)軟件、凝集檢測軟件、臨界值定性軟件、曲線回歸定量軟件。在確定程序模式后，進(jìn)入自檢并完成。在每個(gè)程序模式里選擇所需的測量模式和參數(shù)、計(jì)算模式和參數(shù)。按star健開始檢測。檢測后，結(jié)果會輸出至內(nèi)置打印機(jī)或通過接口輸出。

⒋3.1程序模式1——基礎(chǔ)酶聯(lián)軟件：在檢測前需選擇好測量模式和計(jì)算模式及參數(shù)。

⒋3.1.1測量模式和測量參數(shù)

⒋3.1.1.1測量模式：通過mode鍵來選擇，可通過↑↓鍵查看測量模式目錄。也可通過數(shù)字鍵來選擇測量模式。

⒋3.1.1.2測量參數(shù)：通過meas param鍵或enter鍵來選擇，也可通過↑↓鍵和和數(shù)字鍵輸入新參數(shù)。

可通過meas param鍵和enter鍵來選擇默認(rèn)值或以前設(shè)定的值。

⒋3.1.1.3在程序模式1中有以下測量模式的供選擇：

⒋3.1.1.3.1單波長檢測：用單波長測量吸光值。

⒋3.1.1.3.2雙波長檢測：用雙波長測量吸光值。第二次檢測結(jié)果從第一次檢測中減得。

⒋3.1.1.3.3雙時(shí)法檢測：在兩個(gè)不同的時(shí)間點(diǎn)上測量吸光值。第二次檢測結(jié)果從第一次檢測中減得。

⒋3.1.1.3.4酶標(biāo)動力學(xué)檢測：測量吸光值的變化速度。

⒋3.1.1.3.5多波長檢測：每一列的吸光值用各自不同的波長檢測。

⒋3.1.1.3.6計(jì)算機(jī)控制檢測：儀器由一個(gè)外接計(jì)算機(jī)控制。

⒋3.1.1.4在程序模式1中有以下的測量參數(shù)可供選擇：

⒋3.1.1.4.1力學(xué)檢測：測量吸光值的變化速度。

⒋3.1.1.4.2空白

4 .3 .1 . 1 . 4. 2 .1空白種類：以下空白種類可在1 .2 .3 .4和5中選擇。

1）無試劑空白。

2）單孔試劑空白：輸入空白孔位置。

3) 列平均空白：輸入空白列號（1－12）；采用該列空白值（8個(gè)）的平均值為空白值。

4) 列空白：輸入空白列號（1－12）；每行采用各自不同的空白值。

5) 行平均空白：輸入空白行號（A-H）；采用該行空白值（12個(gè)）的平均值為空白值。

6) 行空白：輸入空白行號（A-H）；每列采用各自不同的空白值。

⒋3.1.1.4.2.2空白形式：

1）每板都設(shè)空白：

2）固定空白：用前一板的空白值，若選固定空白，在檢測下一板前，須選擇1.用舊空白2.重設(shè)空白。

⒋3.1.1.4.3結(jié)果形式（在測量模式2、3、和4中可選擇）

⒋3.1.1.4.3.1最終結(jié)果：吸光值的差值。

⒋3.1.1.4.3.2全部結(jié)果：中間的全部結(jié)果（如濾光片1的吸光值，濾光片2的吸光值）。

⒋3.1.1.4.4時(shí)間設(shè)置：

⒋3.1.1.4.4.1間歇時(shí)間：（在測量模式3、和4中可選擇）

連續(xù)檢測板時(shí)的間歇時(shí)間。最短間歇時(shí)間為5秒，最長為17小時(shí)59分59秒。按時(shí)：分：秒輸入時(shí)間。

⒋3.1.1.4.4.2延遲時(shí)間：（在測量模式4中可選擇）

即在測量開始前的一段時(shí)間，最小延遲時(shí)間為0秒，最長為17小時(shí)59分59秒，按時(shí)：分：秒輸入時(shí)間。4.3.1.1.4.4.3全部時(shí)間：（在測量模式4中可選擇）

即整個(gè)反應(yīng)所需時(shí)間，最小延遲時(shí)間為5秒，最長為17小時(shí)59分59秒，按時(shí)：分：秒輸入時(shí)間。

⒋3.1.2計(jì)算模式和計(jì)算參數(shù)

⒋3.1.2.1計(jì)算模式：用calc mode（計(jì)算模式）鍵設(shè)定?？捎眉^前后查找計(jì)算模式目錄。

⒋3.1.2.2計(jì)算參數(shù)：用calc param（計(jì)算參數(shù)）或enter（回車）鍵設(shè)定計(jì)算參數(shù)。

⒋3.1.2.3請?jiān)诔绦蚰Ｊ?中選擇以下的計(jì)算模式及參數(shù)：

⒋3.1.2.3.1無計(jì)算：結(jié)果以吸光值形式輸出至內(nèi)置打印機(jī)或通過界面接口輸出。

⒋3.1.2.3.2因數(shù)計(jì)算：測出的吸光值和用戶給出的因數(shù)相乘得出濃度，濃度單位由因數(shù)單位確定。

⒋3.1.2.3.3線性標(biāo)準(zhǔn)：用戶輸入標(biāo)準(zhǔn)品濃度，酶標(biāo)儀通過這些標(biāo)準(zhǔn)品，利用最小平方法回歸出一條標(biāo)準(zhǔn)直線，可將測得的吸光值換算成濃度。

⒋3.1.2.3.4標(biāo)準(zhǔn)直線：用戶輸入已知標(biāo)準(zhǔn)直線的斜率和截距來確定標(biāo)準(zhǔn)直線multiskan ms酶標(biāo)儀用以下直線方程式計(jì)算濃度：濃度=A（斜率）×吸光值+B（截距）。

⒋3.1.2.3.5限值計(jì)算：測出的吸光值與用戶定義的一個(gè)限值比較，如結(jié)果低于限值，會出現(xiàn)負(fù)號，相反，會出現(xiàn)正號。

⒋3.1.2.3.6雙限值：測出的吸光值與用戶的兩個(gè)限值比較。如結(jié)果低于兩個(gè)限值，會出現(xiàn)負(fù)號。如結(jié)果在兩個(gè)限值之間出現(xiàn)0，如結(jié)果高于兩個(gè)限值，會出現(xiàn)正號。

⒋3.1.2.3.7范圍計(jì)算：用戶定義的數(shù)值被分成10個(gè)部分，10個(gè)部分編號為0－9。測出的吸光值根據(jù)它所在的部分以0－9中的編號反映出來。

⒋3.1.2.3.8列減法：第二列的結(jié)果減去第一列結(jié)果，第四列的結(jié)果減去第三列結(jié)果，反之。

⒋3.1.2.3.9兩點(diǎn)法：用戶輸入標(biāo)準(zhǔn)品濃度，multiskan ms酶標(biāo)儀通過標(biāo)準(zhǔn)品計(jì)算出一條線性標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過這一曲線，將測得的吸光值轉(zhuǎn)換成濃度。

⒋3.2程序模式2：凝集反應(yīng)軟件（供選）

將ms酶標(biāo)儀與計(jì)算機(jī)連接，進(jìn)入ms程序模式2。選擇濾光片、空白及參數(shù)。在計(jì)算機(jī)上啟動計(jì)算機(jī)控制。開始測量，每孔將測得20個(gè)數(shù)據(jù)并輸出至計(jì)算機(jī)。

⒋3.3程序模式3：臨界值定性軟件（可選）

⒋3.3.1程序模式3中有以下測量模式可選：單波長、雙波長、雙時(shí)法、動力學(xué)方法。

⒋3.3.2程序模式3中有以下測量參數(shù)可選：

⒋3.3.2.1濾光片

⒋3.3.2.2空白

⒋3.3.2.2.1空白種類：

1）無試劑空白

2）單孔試劑空白

3）列平均空白

4）列空白

5) 行平均空白

6）行空白

⒋3.3.2.2.2空白形式：

1) 板都設(shè)空白

2）固定空白

⒋3.3.2.3結(jié)果形式（在測量模式2、3、4中選擇）

⒋3.3.2.3.1最終結(jié)果：吸光值的差值。

⒋3.3.2.3.2全部結(jié)果：中間的全部結(jié)果（如濾光片1的吸光值，濾光片2的吸光值）。

⒋3.3.2.4時(shí)間設(shè)置：

⒋3.3.2.4.1間歇時(shí)間 （在測量模式3、4中選擇）

連續(xù)檢測板時(shí)的間歇時(shí)間。最短間歇時(shí)間為5秒，最長為100分。按分：秒輸入時(shí)間。

⒋3.3.2.4.2延遲時(shí)間 （在測量模式4中選擇）

即在測量開始前的一段時(shí)間，最小延遲時(shí)間為0秒，最大為100分。按分：秒輸入時(shí)間。4.3.3.2.4.3全部時(shí)間（在測量模式4中選擇）

即整個(gè)反應(yīng)所需時(shí)間，最小時(shí)間為5秒，最大為100分。按分：秒輸入時(shí)間。

⒋3.3.3以下計(jì)算模式及他們的參數(shù)可在程序模式3中設(shè)定：

⒋3.3.3.1無計(jì)算：結(jié)果以吸光值輸出至內(nèi)置打印機(jī)或通過界面接口輸出。

⒋3.3.3.2雙限值：測出的吸光值與用戶定義的兩個(gè)限值比較。如結(jié)果低于兩個(gè)限值，會出現(xiàn)負(fù)號。如結(jié)果在兩個(gè)限值之間出現(xiàn)0，如結(jié)果高于兩個(gè)限值，會出現(xiàn)正好。

⒋3.3.3.3范圍計(jì)算：用戶定義的數(shù)值被分成10個(gè)部分，10個(gè)部分編號為0－9。測出的吸光值根據(jù)它所在的部分以0－9中的編號反映出來。

⒋3.3.3.4臨界值：測得的吸光值與臨界值（用陽性或陰性對照測得的吸光值，通過臨界值方程式計(jì)算所得）進(jìn)行比較。

⒋3.4程序模式4：曲線定量軟件（供選）

⒋3.4.1在程序模式4中有以下測量模式：

⒋3.4.1.1單波長檢測：用單波長測。

⒋3.4.1.2雙波長檢測：用雙波長測量吸光值。第二次檢測結(jié)果從第一次檢測中減得。

⒋3.4.1.3雙時(shí)法檢測：在兩個(gè)不同的時(shí)間點(diǎn)上測量吸光值。第二次檢測結(jié)果從第一次檢測中減得。

⒋3.4.1.4動力學(xué)檢測：測量吸光值的變化速度。

⒋3.4.2在程序模式4中有以下測量參數(shù)可選：

⒋3.4.2.1濾光片：在測量模式1234中輸入濾光片的波長或?yàn)V光片號碼。

⒋3.4.2.2空白。

⒋3.4.2.3結(jié)果形式。

⒋3.4.2.4時(shí)間設(shè)置。

⒋3.4.3在程序模式4中有以下計(jì)算模式和參數(shù)：

⒋3.4.3.1無計(jì)算：結(jié)果以吸光值形式輸出至內(nèi)置打印機(jī)或通過界面接口輸出。

⒋3.4.3.2曲線定量：是S行曲線，例如用于激素和腫瘤標(biāo)記物的定量測定。

⒋3.4.3.3計(jì)算參數(shù)：

標(biāo)準(zhǔn)品個(gè)數(shù)：　 允許設(shè)2－8個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品

每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品重復(fù)孔數(shù)：　 每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品允許1－3個(gè)重復(fù)孔

標(biāo)準(zhǔn)品1的濃度：　 輸入標(biāo)準(zhǔn)品1的濃度

標(biāo)準(zhǔn)品1的重復(fù)孔位置： 輸入標(biāo)準(zhǔn)品1重復(fù)孔的位置

標(biāo)準(zhǔn)品2的濃度 ：　 輸入標(biāo)準(zhǔn)品2的濃度

標(biāo)準(zhǔn)品2的重復(fù)孔位置 ：　 輸入標(biāo)準(zhǔn)品2重復(fù)孔的位置

每板都設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品或固定標(biāo)準(zhǔn)品。

單位：無單位U/L，mIU/L，g/l，mg/l，ug/l，ug/ml，ng/ml，mmol/l，umol/，nmol，nmol/l

坐標(biāo)1：LIN/LIN

坐標(biāo)2：LIN/LOG

坐標(biāo)3：LOG/LIN

坐標(biāo)4：LOG/LOG

在測量結(jié)果和數(shù)據(jù)傳送后，用戶需選擇1（接受結(jié)果）或2（重設(shè)新坐標(biāo)）。如結(jié)果被接受，儀器會處于READY狀態(tài)，如需重設(shè)坐標(biāo)，需選擇訓(xùn)新的坐標(biāo)參數(shù)并按下PRINT鍵。新的結(jié)果將輸出。如使用固定標(biāo)準(zhǔn)品，需選擇：1.用原有曲線2.使用新曲線。

⒋4.1在程序模式1和2中，可使用一個(gè)外接計(jì)算機(jī)取代酶標(biāo)儀上的鍵盤。

⒋4.2計(jì)算機(jī)控制通過RS-232C接口實(shí)現(xiàn)。

⒋4.3計(jì)算機(jī)控制由選擇測量模式6中實(shí)現(xiàn)，也可在儀器設(shè)置DTR為高級狀態(tài)并且儀器顯示READY后輸入一個(gè)R命令實(shí)現(xiàn)。

⒋4.4回到鍵盤操作：按STOP鍵或輸入Q命令。

⒋5.1用戶設(shè)定的程序可儲存在儀器內(nèi)存中，以備后用。

⒋5.2儲存可用SAVE鍵后，儀器要求給出程序編號（1－4），輸入程序編號，儀器將顯示“儲存數(shù)據(jù)”。

以后要使用儲存程序時(shí)，按RECALL鍵調(diào)出，并輸入該程序編號即可。

酶標(biāo)儀的功能是用來讀取酶聯(lián)免疫試劑盒的反應(yīng)結(jié)果，因此要得到準(zhǔn)確結(jié)果，試劑盒的使用必須規(guī)范。許多醫(yī)院在使用酶標(biāo)儀之前是通過目測判斷結(jié)果，操作過程隨意性較大，在使用酶標(biāo)儀后如果不能及時(shí)糾正操作習(xí)慣，會造成較大誤差。在酶標(biāo)儀的操作中應(yīng)注意以下事項(xiàng)：

使用加液器加液，加液頭不能混用。

洗板要洗干凈。如果條件允許，使用洗板機(jī)洗板，避免交叉污染。

嚴(yán)格按照試劑盒的說明書操作，反應(yīng)時(shí)間準(zhǔn)確。

在測量過程中，請勿碰酶標(biāo)板，以防酶標(biāo)板傳送時(shí)擠傷操作人員的手。

請勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部，操作完成后請洗手。

如果使用的樣品或試劑具有污染性、毒性和生物學(xué)危害，請嚴(yán)格按照試

劑盒的操作說明，以防對操作人員造成損害。

如果儀器接觸過污染性或傳染性物品，請進(jìn)行清洗和消毒。

不要在測量過程中關(guān)閉電源。

對于因試劑盒問題造成的測量結(jié)果的偏差，應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況及時(shí)修改參數(shù)，以達(dá)到最佳效果。

使用后蓋好防塵罩。

出現(xiàn)技術(shù)故障時(shí)應(yīng)及時(shí)與廠家聯(lián)系，切勿擅自拆卸酶標(biāo)儀。

一、 常見故障

1、 打印機(jī)不工作

⑴ 酶標(biāo)儀后部DIL開關(guān)設(shè)置不正確。DIL標(biāo)準(zhǔn)設(shè)置：左 下下下下下下上下 上上下下上下上上 右（人站在儀器后部，面向儀器）。

⑵ 酶標(biāo)儀內(nèi)置打印機(jī)開關(guān)處于開的位置。應(yīng)在總參數(shù)中設(shè)置內(nèi)置打印機(jī)為關(guān)。

⑶ 打印機(jī)接口接錯(cuò)（接在了計(jì)算機(jī)接口上了）。應(yīng)將打印機(jī)聯(lián)系接在DIL開關(guān)正下方的打印機(jī)接口上，RS-232接口為計(jì)算機(jī)接口。

⑷ 打印機(jī)聯(lián)線有問題：有些配備的新打印機(jī)聯(lián)線仍有問題，請確保打印機(jī)聯(lián)線無問題。

⑸ 打印機(jī)未聯(lián)機(jī)，請確認(rèn)打印機(jī)上的聯(lián)機(jī)鍵已聯(lián)機(jī)。

⑹ 打印機(jī)無紙或紙未裝好，請裝好打印紙。

⑺ 有些打印機(jī)有開機(jī)順序，有的需先開打印機(jī)，后開儀器；有的需先開儀器，后開打印機(jī)。

2、 調(diào)不出所編程序

必須在相應(yīng)程序模塊下調(diào)出。如在臨界值模塊下編輯儲存的程序必須要在臨界值模塊下調(diào)出。

3、 肉眼結(jié)果與酶標(biāo)儀測定結(jié)果差異較大

⒊1 濾光片設(shè)置不正確：請?jiān)凇皡?shù)”中按濾光片輪中實(shí)際的情況設(shè)置濾光片。

⒊2 空白或陰性位置不正確。

二、 儀器的檢查測試

1、 檢測電源部分的輸出電壓

電源部分輸出電壓可以通過檢測MUSCU板上X11元件得到，每個(gè)點(diǎn)的正確對地電壓應(yīng)該是（順序?yàn)閺淖笾劣遥?V、0V（地電壓）、15V、24V、-15V、0V。

2、 光源電壓的測試和調(diào)節(jié)

測量光源電壓，如果發(fā)現(xiàn)所測的結(jié)果不符合規(guī)定要求可以調(diào)節(jié)電源上的R39元件。其操作步驟如下：

⑴ 打開電源開關(guān)，使儀器處在工作狀態(tài)。

⑵ 用電壓表測量光源電壓，正常電壓應(yīng)在6.7～6.9V之間。

⑶ 選擇405nm波長的程序，按“開始”鍵，同時(shí)測量光源處電壓，正常值應(yīng)在7.5～8.1V之間。

⑷ 如果光源電壓不正常，關(guān)閉電源開關(guān)。旋松測量部分上蓋螺絲并移去上蓋。

⑸ 旋松軌道部分的固定螺絲并移動軌道部分（要特別小心以防損傷軌道部分和主板及電源部分的連線?。?，能看到軌道下面的電源即可。

⑹ 打開電源開關(guān)，調(diào)節(jié)電源上R39元件，再重復(fù)上面步驟2測量光源電壓，一直到正確為止。

三、 儀器的校正

1、 調(diào)節(jié)顯示屏幕的亮度

這可以通過調(diào)節(jié)MUSCU板上的R14元件來實(shí)現(xiàn)。

2、 檢查同步性

⑴ 轉(zhuǎn)動斷路器輪

把示波器的探針接在電路板MUSCU2的D29元件的第二個(gè)腳上測定信號的周期，正確的值應(yīng)該介于5.1ms～5.4ms之間。如果超出這個(gè)范圍，可以通過調(diào)節(jié)CHOPT電路板上R3元件來校正。檢測活動結(jié)束后要用帶有顏色的漆鎖定它的正確位置。

⑵ 檢查同步性

a） 按“計(jì)算模式”鍵，選擇1“調(diào)整”，再按“輸入”鍵選擇9“連續(xù)測量”，再按“輸入”鍵兩次選擇增益0，并按“輸入”鍵。

b） 當(dāng)在MACU2板D7元件的第14腳上測量信號的A/D轉(zhuǎn)換時(shí)，測得的時(shí)段信號應(yīng)該在信道的中間。如果不符，可以通過上下移動CHOPT板來調(diào)整。

3、 調(diào)整時(shí)鐘頻率

⑴ 按“計(jì)算模式”選擇1“調(diào)整”，再按“輸入”選擇10“時(shí)鐘頻率”，再按“輸入”。

⑵ 用頻率計(jì)數(shù)器在MUSCU板上的D28元件的第13腳處測定時(shí)鐘頻率，正確的值應(yīng)該為fck=32768Hz。這可以通過調(diào)節(jié)該板上的電容器C4來校正。

⑶ 值得注意的是，在這個(gè)測定過程中不能用“停止”鍵中斷這個(gè)過程。

4、 存儲機(jī)器的系列號

按“計(jì)算模式”選擇2“測試”，按“輸入”選擇4“重復(fù)性20次”，按“輸入”鍵兩次。輸入機(jī)器號（353……），按“停止”兩次。

四、 儀器的檢驗(yàn)

1、 重復(fù)性：

在一定條件下所獲得的獨(dú)立的測定結(jié)果之間的一致性程度即可重復(fù)性，可用CV值來表示。在某一特定的濾光片下測定某一塊酶標(biāo)板20次，用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法求出所有測量值的均值和標(biāo)準(zhǔn)差。公式如下：

所有測量值的標(biāo)準(zhǔn)差

CV %= ————————————×100%

所有測量值的均值

2、 精確性：

待測物的測定值與一可接受的參考值之間的差異。此項(xiàng)指標(biāo)需用雷勃公司標(biāo)準(zhǔn)板（PVT）來測。

測量值 - 參考值

精確性= —————————— ×100%

參考值

3、 光路檢測：

將一塊酶標(biāo)板正放測量一次，再將酶標(biāo)板反放測量一次，查看同一孔吸光值是否相同，從而查看其所有光路8通道是否均一。

⑴ 查看光路上的透鏡是否清潔。

⑵ 燈泡好否及亮度是否正常。

⑶ 濾光片是否清潔。

4、 載軌運(yùn)動：

開機(jī)后酶標(biāo)儀能否自檢，自檢結(jié)束后撳“開始”，查看載軌運(yùn)動是否正常及有無噪聲。

5、 按鍵膜的好壞：

開機(jī)后試用所有按鍵膜，查看其功能是否完好。